一、试验原理
用途:用于军团菌的分离培养。
原理:酵母浸粉提供军团菌生长所必需的营养物质;可溶性焦磷酸铁、α-酮戊二酸、ACES缓冲液、活性炭和添加剂成分中的甘氨酸、盐酸半胱氨酸共同提供军团菌生长及分离所需的条件;添加剂中的抗生素抑制其他细菌生长;琼脂为凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
|
酵母浸粉 |
10.0 |
|
ACES缓冲液 |
10.0 |
|
活性炭 |
2.0 |
|
可溶性焦磷酸铁 |
0.25 |
|
α-酮戊二酸 |
1.0 |
|
琼脂 |
15.0 |
|
pH值6.9±0.2(25℃) |
|
三、试验方法
1、称取本品40.95 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶100 mL,121℃高压灭菌15 min,冷至50℃左右时,每100 mL加入1套GVPC琼脂添加剂,混匀,倾入无菌平皿,备用。
2、制备质控菌株菌悬液,划线接种于待测培养基。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养72 h-168 h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养72h-168h。试验结果如图所示。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其它特征 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
/ |
- |
抑制 |
|
博兹曼氏军团菌 |
ATCC 33217 |
/ |
+++ |
蓝白色菌落,有蓝色荧光 |
|
嗜肺军团菌 |
ATCC 33152 |
/ |
+++ |
白灰色菌落 |
图1 GVPC琼脂基础培养基的质控菌株培养结果
五、注意事项
每瓶需配套添加24盒HB8496a GVPC添加剂使用,每100ml GVPC琼脂基础需添加1盒HB8496a GVPC添加剂。
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