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柯少夫(Korthof)培养基
2026/3/5 17:04:15 现代微生物培养基和试剂手册

【原理】

  钩端螺旋体生长繁殖慢,对营养要求较高,pH要恒定,此培养基中加有蛋白胨及兔血清,足以满足其营养要求,所加的磷酸盐可使培养基的pH恒定,因而钩体可以很好生长繁殖。


【成分】

蛋白胨
400mg
氯化钠
700mg
碳酸氢钠
10mg
氯化钾
20mg
氯化钙
20mg
磷酸二氢钾
120mg
磷酸氢二钠
440mg
蒸馏水
500ml
无菌兔血清
8~10ml

【制法】

  (1)将各物溶于蒸馏水内煮沸20分钟,以滤纸滤过,调整至pH7.2,分装于烧瓶内,每并100ml121℃灭菌20分钟;

  (2)用无菌手续采取兔心血分离血清,置56℃水浴箱中30分钟以破坏补体;

  (3)上述蛋白胨盐溶液每100ml中加入无菌兔血清8~10ml

  (4)混合后,用无菌手续分装于中号试管中,每管5ml;

  (5)继续放置56℃水浴箱中加温半小时;

  (6)37℃孵箱中孵育2天,剔去污染者。


【用途】

  用于增殖培养钩端螺旋体。


【注意事项】

  1.为防止污染,可在每100ml培养基中加50mg磺胺嘧啶钠。

  2.为了促进钩端螺旋体生长,可于该培养基中加入维生素B121mg/1000ml)及烟碱酸(1mg/1000ml),并将兔血清量自8%减至5%,培养基中不加CaCl2CaCl2对生长无作用,且常形成沉淀物。灭菌时间改为两次,第1次高压灭菌,然后用滤纸过滤,再以100℃加热30分钟。用此法制得培养基清晰,无任何沉淀。
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