稀释法

即最低(或最小)抑菌浓度( minimal inhibitory concentration, MIC)的测定。

1.基本原理在肉汤或琼脂中将抗菌药物进行一系列(对倍)稀释后，定量接种待检菌，35℃孵育24 h后观察。待检菌肉眼未见生长的最低药物浓度，即为该药物对待检菌的最低抑菌浓度。

2 . 试验方法 取无菌试管26 支，排成两排。另取3 支试管，分别作为肉汤对照管、待检菌生长对照管和质控菌生长对照管。每管加入M- H 肉汤2 ml，在第1 管加入经M- H 肉汤稀释的药物原液( 256 mg/ L)2 ml 混匀，然后吸取2 ml 至第2 管，混匀后再吸取2 ml 至第3 管。如此连续对倍稀释至第13 管，并从第13管中吸取2 ml 弃去。此时各管含药浓度依次为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/ L 。第1 排试管每管加入待检菌菌液(1 X 107 CFU/ ml0.1 ml ，第2 排试管每管加入标准菌菌液(1 X 107 CFU/ ml) 0.1 ml，最终接种菌量约为5 X 105 CFU/ ml 。置35℃培养箱孵育18~24 h，观察有无细菌生长。

3. 结果判断药物最低浓度管无细菌生长者(对照管细菌生长良好) ，即为待检菌的最低抑菌浓度( MIC)不计。