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副溶血性弧菌的分离
2014-7-29 10:46:14 海博生物

样品应及时检验

鱼类和头足类动物取表面组织、肠或鳃。贝类取全部内容物,包括贝肉和体液;甲壳类取整个动物,或者动物的中心部分,包括肠和鳃。如为带壳贝类或甲壳类,则应先在自来水中冲洗外壳并甩干表面水分,然后以无菌操作打开外壳。


以无菌操作取样25g(mL)加入3%氯化钠碱性蛋白胨水225mL,用旋转刀片式匀质器以8000rpm匀质1min,然后放在500mL的灭菌容器内,加225mL3%氯化钠碱性蛋白胨水,并充分振荡。


在所有显示生长的试管或增菌液中用接种环沾取一环,于TCBS平板或科玛嘉弧菌显色培养基平板上划线分离。一支试管划线一块平板,于36℃土1℃培养18h~24h。

典型的副溶血性弧菌在TCBS上呈圆形、半透明、表面光滑的绿色菌落,用接种环轻触,有类似口香糖的质感,直径2mm~3mm。从培养箱取出TCBS平板后,应尽快(不超过l h)挑取菌落或标记,要挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在科玛嘉弧菌显色培养基上呈圆形、半透明、表面光滑的粉紫色菌落,直径2mml~3mm。

纯培养:挑取三个或以上可疑菌落,划线3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂平板,36℃士1℃培养18h~24h。

 

 


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