工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5代，（从菌种保藏中心获得的标准菌株为第0代）防止过度的传代造成菌种变异。1代是指将活的培养物接种到新鲜培养基中，任何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。必要时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。

细菌的接种、分离和培养

接种、分离、培养是微生物学实验的基本

作技术，要求严格的无菌操作和在无菌环境下进行。      

常用培养基种类

斜面接种

半固体培养基

液体培养基

平板培养基

接种方法

涂布法

划线法

穿刺法

直接加入法等

分离：

 分段划线法、连续划线法、涂布分离法、倾注分离法等。

培养 ：接种后的培养基，根据不同微生物生长条件的要求，置培养基于适宜微生物生长的环境中，使其生长繁殖的过程。

 需气培养法

 厌氧培养法

培养后微生物的生长判断

固体培养基

液体培养基