由于某些不活泼的大肠埃希氏菌（anaerogenic E.coli）、A-D（Alkalescens-D isparbiotypes碱性-异型）菌的部分生化特征与志贺氏菌相似，并能与某种志贺氏菌分型血清发生凝集；因此符合志贺氏菌属生化特性的培养物还需另加葡萄糖胺、西蒙氏柠檬酸盐、粘液酸盐试验(36 ℃培养24 h～48 h)。

西蒙氏柠檬酸盐实验

挑取少量琼脂培养物接种，于36±1℃培养4d，每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。

葡萄糖铵实验

鉴别细菌能否利用铵盐作为唯一氮源并分解葡萄糖产酸，溴麝香草酚兰是指示剂，产酸时培养基由绿色变为黄色。

粘液酸盐实验

细菌如能利用粘液酸盐，则可分解而产酸，使培养基中的溴麝香草酚兰呈黄色。