一、用途及介绍

  用途：此培养基常用于药品及生物制品中的需氧/厌氧菌检验及厌氧菌的增菌培养。

  培养基状态和性质：制备好的硫乙醇酸盐流体培养基呈淡黄色透明流体状，有一定黏度，上下分层。上层由于接触空气中的氧气，培养基内含的刃天青显淡红色，需氧菌可在此处生长。下层为厌氧层，呈淡黄色，厌氧菌可在此处生长。

  优点：硫乙醇酸盐流体培养基中因含有少量琼脂，培养基内无液体对流现象，且含有还原性的胱氨酸、硫乙醇酸钠，因此可以稳定地保持下层的厌氧环境。在进行厌氧菌的增菌培养时，无需借助厌氧罐、厌氧培养箱等设备，也无需覆盖液体石蜡，即可达到良好的培养效果，因此非常适合用于厌氧菌的复苏及增菌培养。

二、使用方法及注意事项

  培养基制备：参照标签，按比例称取培养基加热溶解于纯化水中，分装至试管或瓶中，121℃高压灭菌，冷却后备用。

  注意事项：

  1.培养基中含有少量琼脂，因此在灭菌前需加热煮沸至培养基内的琼脂完全溶解且分布均匀，方可进行分装，灭菌；

  2.培养基分装容器时，装量应与容器比例合适，选择细高型容器分装更有利于减少氧化层的高度，若分装密闭容器中空气较多，可充入氮气后再进行密封；

  3.使用前注意观察培养基氧化层的高度，在供试品检查前，培养基氧化层高度不能超过培养基深度的1/5；若超过1/5，可对培养基进行沸水浴加热驱氧，只限加热一次；

  4.硫乙醇酸盐流体培养基不可振荡培养，只能静置培养。振荡会使培养基上下层产生液体对流，无法维持下层培养基的无氧状态，因此会导致厌氧菌不能生长。

三、常见问题

  1.制备好的培养基整瓶呈现淡黄色，看不到红色氧化层是怎么回事？

  答：通常在密闭容器里的硫乙醇酸盐流体培养基会出现这个现象。硫乙醇酸盐流体培养基上层只有接触氧气才会变红，若上层没有氧气接触，就会整体呈淡黄色。自制密闭灭菌后的培养基，若容器内残留空气很少，或灭菌前进行了充氮气排氧，灭菌后可能会看不到氧化层。

  2.灭菌后培养基是澄清的，冷却后出现部分白色絮状物，是什么原因？

  答：硫乙醇酸盐流体培养基内有少量琼脂，如果配制不当，琼脂未充分溶解分布均匀，灭菌冷却后聚集的琼脂凝固成团块，就会出现白色絮状物。因此在灭菌前必须加热至琼脂完全溶解并充分搅拌，使琼脂在培养基中分布均匀，再进行高压灭菌，冷却后的培养基就是澄清的淡黄色透明流体状。

  3.灭菌后的培养基颜色偏深黄，且pH偏低不合格，是什么原因？

  答：这种情况一般是灭菌过度造成的。培养基中的酵母浸粉和葡萄糖在灭菌过度后易出现糖焦化现象，造成颜色偏深，pH下降，严重时可能观察不到氧化层。因此在培养基灭菌结束后，需及时从灭菌锅中取出，避免长时间灭菌或保温，更不可重复高压灭菌。

  4.灭菌后的培养基，分装试管使用时，整根试管变红色，是否还能使用？

  答：此培养基建议先加热煮沸溶解，分装，再灭菌。如先灭菌后分装，由于分装过程中培养基接触氧气，刚分装结束时，部分培养基可能呈现全红色，一般室温静置1h左右可重新见到分层现象。如静置后仍然整体培养基呈红色不分层，可沸水浴加热驱氧，冷却后即可重新出现分层。重新分层的培养基可正常使用。

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