TGC培养基的原理及使用方法

郭鹏

2024-11-7 16:30:55 青岛海博生物

一、产品用途及原理

用途：用于药品、生物制品需氧菌和厌氧菌的无菌试验。

原理：蛋白胨和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长；L-胱氨酸和硫乙醇酸钠均能使体系处于低氧化还原电势，有利于消除菌体生长代谢过程中产生的对自身有害的过氧化物质，同时L-胱氨酸的巯基（-SH）可以中和重金属的毒性，因此可以用于带有重金属物质的无菌检验；氯化钠维持均衡的渗透压；刃天青作为氧化还原指示剂，氧化态为粉红色，还原态为无色；少量琼脂可阻止二氧化碳、氧气扩散进入培养基中。

二、培养基配方（g/L）

蛋白胨	15.0
酵母浸粉	5.0
葡萄糖	5.0
硫乙醇酸钠	0.5
L-胱氨酸	0.5
氯化钠	2.5
刃天青	0.001
琼脂	0.8
pH值7.0-7.2（25℃）

三、实验方法

1、称取本品30.0g，加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中，分装试管，每管10mL，121℃高压灭菌15分钟。在高压灭菌后不要立即放至冰箱冷却，而应在室温中冷却。当试管中的培养基有1/3以上变成红色时不能使用，可通过水浴或蒸汽加热（仅可加热一次）去除红色。

2、制备质控菌液接种到TGC培养基中。

3、放置于30℃-35℃需氧培养24h-72h。

四、结果观察

接种以下质控菌株，放置于30℃-35℃需氧培养24h-72h，培养结果如图1所示。

质控菌株	菌株编号	接种量（CFU）	生长情况	其它特征
金黄色葡萄球菌	CMCC(B) 26003	10-100	+++	在试管中呈颗粒生长
铜绿假单胞菌	CMCC(B) 10104	10-100	+++	在试管表层生长，浑浊
枯草芽孢杆菌	CMCC(B) 63501	10-100	+++	在试管表层生长，浑浊
生孢梭菌	CMCC(B) 64941	10-100	+++	在试管氧化层以下呈条状生长
产气荚膜杆菌	ATCC 13124	10-100	+++	在试管氧化层以下呈条状生长