一、非选择性增菌培养基的介绍
非选择性增菌培养基常用于细菌的复苏、活化、增菌培养等,组成为常见的营养成分(如蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等)和盐类(磷酸盐、氯化钠等),一般不具有针对性,适用于多种细菌的生长,对营养成分进行补充也可用于一些特定细菌的培养,添加抗生素或其他抑菌成分也可制成选择性增菌培养基,常见的非选择性增菌培养基有营养肉汤(NB)、胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、脑心浸液肉汤(BHI)、缓冲蛋白胨水(BPW)等。
二、培养基的出厂检验
待测培养基制备:按照说明书进行配制,分装至试管,每管10mL,灭菌冷却后备用。
菌悬液制备:将质控菌株接种至非选择性肉汤或平板中进行活化培养,使用生理盐水或磷酸盐缓冲液进行十倍系列稀释至含菌量为10-100CFU/mL。
接种及培养:吸取1mL制备好的菌悬液加入至待测培养基试管中,接种2支平行,同时使用TSA(或其他适宜培养基)进行倾注,计数接种量,置于标准中规定的条件下进行培养。
结果判定:接种目标菌的试管浊度值应达到2。
注:如增菌时间小于8小时,培养结束后吸取10μL菌液需用TSA倾注计数,菌数应大于100CFU。
营养肉汤(NB)
三、培养基的验收方法
将质控菌株接种至非选择性肉汤培养基中过夜培养,稀释至10-3,也可采用其他方法制备含菌量105-107CFU/mL的菌悬液,使用1μL接种环挑取1环菌液,接种至待测培养基中,置于标准规定的条件进行培养。
结果判定:接种目标菌的试管浊度值应达到2.
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