一、悬浮和运输培养基的介绍
在进行微生物检验工作时,经常会用到一些样品制备或者样品运输的培养基,其目的是保证微生物的活性,要求微生物存活并且不能过分增殖,处于相对稳定的一个状态。用于样品制备和菌液稀释的磷酸盐缓冲液、0.1%蛋白胨水等都属于悬浮培养基,而用于采样运输的Cary-Blair氏运送培养基、Amies运送培养基等都属于运输培养基。
二、培养基的出厂检验
待测培养基制备:按照说明书进行配制,分装至试管,每管10mL(有特殊要求也可选用5mL)。
1.接种及计数
菌悬液制备:将质控菌株接种至非选择性肉汤或平板中进行活化培养,使用生理盐水或磷酸盐缓冲液进行十倍系列稀释至适宜梯度。
在装有待测培养基的试管中接种100 CFU~1000 CFU的目标菌,同时接种两个平行管,混匀后,立即吸取1mL待测培养基混合液,使用非选择性固体培养基倾注,每管接种1个平板;将剩余已接种菌液的待测培养基置20℃~25℃放置45min后;再吸取1 mL倾注平板,使用非选择性固体培养基倾注,将平板置相应温度下进行培养。
培养结束后,计数静置前后平板上的菌落数。
2.结果判定
静置前后菌落数变化应在±50%。
静置变化率=(静置后平板菌落数-静置前平板菌落数)/静置前平板菌落数×100%
三、培养基的验收方法
菌悬液制备:将目标菌接种至非选择性肉汤中过夜培养。
接种:用1μL接种环取一环工作菌悬液直接接种到装有待测培养基的试管中,混匀后,立即用10μL接种环取一环工作菌培养物划平行线接种平板,按标准方法中规定的培养时间和温度培养;剩余已接种菌液的待测培养基置20℃~25℃放置45min后,再用10μL接种环取一环工作菌培养物划平行线接种平板,按标准方法中规定的培养时间和温度培养。
结果判定:静置前后接种平板上的目标菌应生长良好。
注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。
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