动力-吲哚-尿素培养基的原理及使用方法

李令梅

2024-7-10 16:27:53 青岛海博生物

一、产品用途及原理：

用于细菌的复合生化试验（动力靛基质尿素酶试验）。

培养基为含尿素、蛋白胨的半固体培养基，指示剂为酚红。具有色氨酸酶的细菌能分解色氨酸产生吲哚，加入吲哚试剂后，培养基上层的吲哚会变红；有动力的细菌沿穿刺线扩散生长；有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶不是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶，其活性最适pH为7.0。

二、培养基配方（g/L）：

胰蛋白胨	10.0
磷酸氢二钾	2.0
氯化钠	5.0
酚红	0.012
葡萄糖	1.0
琼脂	4.0
pH 7.0±0.1 25℃

三、试验方法：

1. 称取本品22g，加热溶解于950ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷却至45-50℃左右时，无菌加入40%的尿素溶液50mL，混匀，分装试管备用。

2. 制备质控菌株。

3. 用接种针挑取新鲜菌苔穿刺接种于试管中。

4. 36±1℃培养18-24小时，扩散生长为动力阳性；滴加吲哚试剂后呈玫瑰红色为阳性；培养基变红尿素阳性，记录实验结果。

四、结果观察与解释

接种以下质控菌株，36±1℃培养18-24小时：

质控菌株	菌株编号	接种量(CFU)	生长情况	其他特征
鼠伤寒沙门氏菌	ATCC14028	/	+++	动力+、吲哚-、尿素-
普通变形杆菌	ATCC19114	/	+++	动力+、吲哚+、尿素+
大肠埃希氏菌	ATCC25922	/	+++	动力+、吲哚+、尿素-
福氏志贺氏菌	ATCC12022	/	+++	动力-、吲哚-、尿素-