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抗生素检测培养基II的试验方法与现象
姜斯媛
2024-8-2 16:05:16 青岛海博生物

一、产品用途

  用于拮抗剂的检测。


二、试验原理

  本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与抗生素浓度或活性相关,比较标准品与供试品两者对接种的实验菌产生抑菌圈的大小,以测试供试品效价的一种方法。


三、培养基配方(g/L)

蛋白胨

10.0

牛肉粉

3.0

酵母浸粉

3.0

葡萄糖

1.0

氯化钠

5.0

琼脂

14.0

  此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果


四、试验方法

  1、称取本品36.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15min,备用。

  2、将质控菌株稀释至合适梯度,制成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。

  3、取平板分别注入加热融化的培养基20ml,放置水平台上使之凝固,作为底层。另取适量培养基,在48-50℃加入规定菌量的菌悬液,摇匀。在平板中分别加入5ml,使其在顶部摊布均匀,作为菌层,放置在水平台上冷却凝固。

  4、在凝固的平板中放置牛津杯,用压杯板压置10秒。

  5、在每一个小管中加入标准品,转移至培养箱30℃培养24-36小时。


五、试验结果

  接种以下质控菌株,在36±1℃培养18-22小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

回收率

生长情况

其他特征

藤黄微球菌

CMCC(F)28001

50-100CFU

/

+++

黄色菌落

  质控结果:


六、注意事项

  1、注入培养基总量不大于20ml,否则放置牛津杯后平皿盖无法盖紧。

  2、菌量浓度适宜,若菌量浓度过小,则菌层生长弱做不出抑菌圈

  3、菌层培养基表面应平整,否则漏液。

  4、牛津杯中央有凸点为正面。

  5、压杯板已辐照灭菌,酒精棉擦拭可重复使用。

  6、将平皿转移至培养箱培养过程中应保持稳定,以免影响实验效果。


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