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乳酸杆菌选择性琼脂原理和使用方法
丁鑫鑫
2024-8-9 15:45:13 青岛海博生物

一、产品用途及原理:

  用于乳酸菌检测和分离培养。

  胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖提供碳源;磷酸二氢钾为缓冲剂;柠檬酸铵、硫酸镁、硫酸锰、亚硫酸铁、吐温80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸;柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长,包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它细菌的生长,有利于乳酸杆菌的分离;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

胰酪蛋白胨

10.0

酵母浸粉

5.0

磷酸二氢钾

6.0

柠檬酸铵

2.0

乙酸钠

25.0

硫酸镁

0.575

硫酸锰

0.12

亚硫酸铁

0.034

吐温80

1.0

葡萄糖

20.0

琼脂

15.0

pH 5.5±0.225℃


三、试验方法:

  粉体装培养基的使用:

  1. 称取本品84.7g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,并吸取1.32ml冰乙酸混匀,加热溶解并不停搅拌,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿,无需高压灭菌。

  2. 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。

  3. 制备质控菌液。

  4. 选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板上,每一稀释度接种两个平板。

  5. 36±1℃培养24-48小时,记录实验结果。


四、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,36±1℃培养24-48小时:

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

质控评定标准

其他特征

嗜酸乳杆菌

CICC 6005

20-200

PR≥0.5

白色突起菌落

植物乳杆菌

ATCC 8014

20-200

PR≥0.5

白色突起菌落


图1-1 乳酸杆菌选择性琼脂微生物质控结果

备注:a:嗜酸乳杆菌,b:植物乳杆菌


五、注意事项

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

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