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叠氮钠-七叶苷琼脂培养基检验原理和使用方法
张辉
2024-8-30 15:47:19 青岛海博生物


一、试验用途及原理:

  该培养基用于肠球菌的选择性分离培养。

  蛋白胨、胰酪蛋白胨和酵母粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子;牛胆粉可以抑制大部分革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持培养基均衡的渗透压;有些细菌可将七叶苷分解为葡萄糖与七叶素,七叶素与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;叠氮化钠主要抑制革兰氏阴性细菌的生长,对变形杆菌抑制效果非常显著;柠檬酸钠可抑制肠道菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。


二、培养基配方(g/L):

蛋白胨

3.0

胰酪蛋白胨

17.0

酵母粉

5.0

牛胆粉

10.0

氯化钠

5.0

七叶苷

1.0

柠檬酸铁铵

0.5

叠氮化钠

0.25

柠檬酸钠

1.0

琼脂

13.5

pH值7.1±0.2(25℃)


三、试验方法:

  1. 称取本品56.25g,加热煮沸完全溶解于1000mL蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,倾入无菌平皿,备用。

  2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液,吸取适宜梯度的菌悬液涂布接种于待测培养基和参比培养基上。

  3. 放置于恒温培养箱35℃±2℃需氧培养24h±2h,观察试验结果。


四、试验结果判断:

  接种以下质控菌株,放置于35℃±2℃需氧培养24h±2h,试验结果如图1所示。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

参比或计数培养基

方法

生长情况

其他特征

粪肠球菌

ATCC 29212

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

褐色菌落,菌落周围变黑

屎肠球菌

ATCC 27270

10-100

TSA

定量

PR≥0.7

褐色菌落,菌落周围变黑

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

100-1000

TSA

定量

-

抑制

金黄色葡萄球菌

ATCC 25923

100-1000

TSA

定量

-

抑制

  质控菌在TSA上的计数结果:


  质控菌在叠氮钠-七叶苷琼脂上的生长情况:

图1 叠氮钠-七叶苷琼脂培养基微生物质控结果


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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。


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