洋葱伯克霍尔德菌群选择性琼脂（BCCSA）培养基的原理及现象

王娟

2024-11-25 14:10:52 青岛海博生物

一、培养基的用途及原理

用于药品中洋葱伯克霍尔德菌群的选择性培养。

胰蛋白胨、酵母提取物提供细菌生长的基本营养，氯化钠维持渗透压，丙酮酸钠可刺激洋葱伯克霍尔德菌群的生长，磷酸二氢钾为缓冲剂，琼脂为凝固剂，酚红为酸碱指示剂。稍偏酸的pH使培养基呈现为黄色，培养基中含少量的蔗糖有助于洋葱伯克霍尔德菌群的生长，由于产酸不多且易被氧化成碱性物质，同时洋葱伯克霍尔德菌群产碱能力较强，生长时会导致培养基的pH逐渐升高，培养基的颜色由黄色逐渐变为红色，因此洋葱伯克霍尔德菌群在此培养基上菌落通常偏红色，菌落周围培养基变红。培养基中添加的庆大霉素、万古霉素、多粘菌素对多数革兰氏阴阳性菌都有较强的抑菌效果。

二、成分（g/L）

胰蛋白胨	10.0
蔗糖	2.0
酵母提取物	1.5
结晶紫	0.001
丙酮酸钠	7.0
磷酸二氢钾	1.54
氯化钠	5.0
酚红	0.02
琼脂	14.0
庆大霉素	0.01
万古霉素	0.0025
多粘菌素B	600000U
pH	6.2±0.2

三、配制方法

称取本品41.06g，加热煮沸完全溶解于1000ml纯化水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷却至45℃~50℃时，每200ml培养基中加入1支BCCSA抑菌剂(含庆大霉素2mg,万古霉素0.5mg,多粘菌素B120000U)，混合均匀，倾入无菌平皿，备用。

四、生长现象及结果观察

接种以下菌株至BCCSA培养基平板，30-35℃需氧培养48-72h。

质控菌株	菌株编号	接种量/CFU	生长现象
洋葱伯克霍尔德氏菌	CMCC23005	10-100	培养基变红
新洋葱伯克霍尔德菌	CMCC23006	10-100	培养基变红
神秘伯克霍尔德菌	CMCC23010	10-100	培养基变红
金黄色葡萄球菌	CMCC26003	100-1000	抑制
铜绿假单胞菌	CMCC10104	100-1000	抑制