出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法
2009-2-16 14:06:21 青岛海博生物
一、培养基明细
名称 规格 价格(元)
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) 250g 90
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB) 250g 190
EC肉汤 250g 90
伊红美蓝琼脂(EMB) 250g 260
营养琼脂斜面 250g 80
色氨酸肉汤 20支 15
MR-VP培养基 250g 80
Korser氏枸橼酸盐肉汤 2ml*20 20
结晶紫中性红胆盐倾注(VRBA) 250g 100
Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液 250g 195
革兰氏染色液 5ml*8 40
Kovacs氏靛基质试剂 5ml*2 20
甲基红指示剂 5ml*2 20
Voges-pros kauer(V-P)试剂 20支 15
氯化钠(NaCL) 500g 6
二、备注:
1、依据SN 0169—92出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法 适用于出口食品的检验。
2、样品制备:
以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用75%乙醇在开口处擦拭后取样。若不能及时检验,应将冷冻样品置于-15℃保存,非冷冻而易腐的食品,应置于-4℃冰箱保存。检验前冷冻样品可于2—5℃ 18h内解冻,或在45℃以下15min内解冻。
(1)液体食品样品匀液的制备:
以灭菌吸管取样25ml放入装有225ml稀释剂的灭菌玻璃瓶(瓶内预置适当数量的玻璃珠),以30cm幅度、于7s内振摇25次(或以机械振荡器振摇),制成1:10的样品匀液。
(2)固体和半固体食品样品匀液的制备:
以无菌操作称取25g样品,放入装有225ml稀释剂的灭菌均质杯内,于3000r/min均质1—2min,制成1:10的样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。
3、术语:
(1)大肠杆菌:大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli) 革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米。周身鞭毛,能运动,无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌。大肠杆菌是人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌,主要寄生在大肠内。它侵入人体一些部位时,可引起感染,如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。人在感染大肠杆菌后的症状为胃痛、呕吐、腹泻和发热。感染可能是致命性的,尤其是对孩子及老人。
(2)大肠菌群:大肠菌群是指一群好氧及兼性厌氧,在37℃、24h能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌,它主要包括肠杆菌科的大肠埃希氏菌、枸椽酸杆菌、克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。它主要来源于人畜粪便,通常可作为水体粪便污染的指标菌。
(3)粪大肠菌群:总大肠菌群中一类在46℃、24士2h培养下仍然能够产酸产气的、厌氧或者兼性好氧的G-杆菌。