金黄色葡萄球菌计数——2008GB
2009-4-23 15:25:43 青岛海博生物
一、培养基明细:
名称 规格 价格(元)
胰酪胨大豆肉汤(TSB) 250g 85
Baird-Parker琼脂基础 250g 225
亚碲酸盐卵黄增菌液 5ml*10 65
脑心浸液肉汤(BHI) 250g 120
兔血浆 0.5ml*10 65
磷酸盐缓冲液(PH7.2) PBS 250g 80
营养琼脂斜面 250g 80
革兰氏染色液 5ml*8 40
无菌生理盐水 * *
1mol/l的NaOH * *
1mol/l的HCL * *
二、备注
1、金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。
2、胰酪胨大豆肉汤,其配方与10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤相同,即为TSB。
3、革兰氏染色液:
(1)结晶紫染色液
成分:
结晶紫 1.0g
95%乙醇 20.0ml
1%草酸铵水溶液 80.0ml
制法:将结晶紫完全溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
(2)革兰氏碘液
成分
碘 1.0g
碘化钾 2.0g
蒸馏水 300ml
制法:将碘与碘化钾先行混合,加入蒸馏水少许充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至300ml。
(3)沙黄复染液
成分
沙黄 0.25g
95%乙醇 10.0ml
蒸馏水 90.0ml
制法:将沙黄溶于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
(4)试验方法
涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染液,染1min,水洗。
滴加革兰氏碘液,染色1min,水洗。
滴加95%乙醇脱色15—30s,直至染色液被洗掉,不要过分脱色,水洗。
滴加复染液,复染1min,水洗,待干,镜检。