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金黄色葡萄球菌计数——2008GB
2009-4-23 15:25:43 青岛海博生物
一、培养基明细:
    名称                                 规格    价格(元)
胰酪胨大豆肉汤(TSB)                   250g       85
Baird-Parker琼脂基础                      250g       225
亚碲酸盐卵黄增菌液                       5ml*10     65
脑心浸液肉汤(BHI)                      250g       120
兔血浆                                   0.5ml*10    65
磷酸盐缓冲液(PH7.2)  PBS                  250g       80
营养琼脂斜面                              250g       80
革兰氏染色液                               5ml*8      40
无菌生理盐水                                *          *
1mol/l的NaOH                               *          *
1mol/l的HCL                                *          *  
二、备注
1、金黄色葡萄球菌
   金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。
2、胰酪胨大豆肉汤,其配方与10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤相同,即为TSB。
3、革兰氏染色液:
(1)结晶紫染色液
  成分:
     结晶紫           1.0g
     95%乙醇          20.0ml
     1%草酸铵水溶液   80.0ml
  制法:将结晶紫完全溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
(2)革兰氏碘液
  成分
     碘                1.0g
     碘化钾            2.0g
     蒸馏水            300ml
  制法:将碘与碘化钾先行混合,加入蒸馏水少许充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至300ml。
(3)沙黄复染液
  成分
     沙黄        0.25g
     95%乙醇    10.0ml
     蒸馏水      90.0ml
   制法:将沙黄溶于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
(4)试验方法
     涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染液,染1min,水洗。
     滴加革兰氏碘液,染色1min,水洗。
     滴加95%乙醇脱色15—30s,直至染色液被洗掉,不要过分脱色,水洗。
     滴加复染液,复染1min,水洗,待干,镜检。   
   
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