第三节 细菌的代谢与培养基
新陈代谢( metabolism)足生物有机体基本的特征之一,是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。细菌吸收了外界的营养,在酶的作用下将其分解,再在酶的作用下台成细菌菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生,紧密相关,维持了细菌细胞的生命,进行细菌的生长。通过检测细菌系统及代谢产物的生理,来鉴定细菌的
试验称生化试验。
生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。
l.代谢试验
①氧化发酵试验O-F;②糖(醇)类发酵试验;③VP和甲基红试验
2.蛋白质代谢试验
①蛋白水解试验;②硫化氢试验;③吲哚试验;④脱羧酶试验;③脱氨试验;⑥尿素酶试验。
3.盐类代谢试验
①枸橼酸盐试验;②丙二酸盐利用试验;③硝酸盐还原试验
4.呼吸酶类试验
①氧化酶试验;②细胞色素氧化酶试验
表 IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用
菌名 |
吲哚(I) |
甲基红(M) |
VP(Vi) |
枸橼酸盐(C) |
大肠埃希菌 |
+ |
+ |
- |
- |
产气肠杆菌 |
- |
- |
+ |
+ |
志贺菌属 |
- |
+ |
- |
- |
沙门菌属 |
- |
+ |
- |
+ |
表 硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别
试验 |
伤寒沙门菌 |
甲型副伤寒沙门菌 |
变形杆菌 |
志贺菌属 |
大肠埃希菌 |
克雷伯菌属 |
硫化氢试验 |
-/+ |
+++ |
+++ |
- |
- |
- |
尿素酶试验 |
- |
- |
+ |
- |
- |
+ |
乳糖发酵试验 |
- |
- |
- |
- |
+ |
+ |
在培养基中加入指示剂或某种化学物质抑制不需要的细菌生长,利于需要的细菌分离,这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。
例如,在培养基内加入青霉素可抑制革兰阳性细菌,而利于革兰阴性细菌的生长;如果加入链霉素,则可获得与加青霉素相反的选择效果;加入制霉素可抑制真菌,有利于细菌的分离。又如亚硫酸铋琼脂,既能抑制革兰阳性细菌生长,又能抑制许多革兰阴性细菌生长,但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床细菌检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上,因发酵乳糖而产酸,使指示剂中性红变深,并使胆盐沉淀,所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢,硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁,所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌,既不发酵乳糖也不产生硫化氧,所以菌落无色透明,中等大小。粪链球菌可被枸橼酸钠抑制。枸橼酸铁有中和中性红的毒性的作用。硫代硫酸钠可缓解胆盐对志贺菌的毒害,中和煌绿和中性红的毒性,还可使大肠埃希菌落颜色鲜艳。常用的选择性培养基还有麦康凯( MacC)琼脂、伊红美兰(EMB)
琼脂、胆硫乳( DHL)琼脂及碱性琼脂等。