将划线分离培养37℃24h的平板从温箱中取出，挑取单个菌落，经涂片、染色镜检，证明不含杂菌，此时用接种环挑取单个菌落，移植于琼脂斜面培养，所得培养物即为纯培养物，再作其它各项试验检查和致病性试验等。具体操作方法如下：                   

1. 接种环移植法  两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和新鲜空白琼脂斜面各一管，使管口互相并齐，稍上斜，管底握于手中，松动两管棉塞，以便接种时容易拔出。右手食指和拇指执接种环，烧灼接种环，以右手小指扭开一管的棉塞，无名指扭开第二管的棉塞。棉塞头向掌心内，将试管口通过酒精灯火焰灭菌，待冷却后将接种环插入菌种管中，钓取细菌少许取出接种环立即接种在新鲜空白琼脂斜面上，不要碰及管壁，直达斜面底部。从斜面底部开始划曲线或直线，向上至斜面顶端为止，管口通过火焰灭菌后，塞好棉塞。接种完毕，将接种环烧灼灭菌后放下接种环。用蜡笔在试管上标明细菌名称和接种日期，置37℃温箱中培养。

2. 吸管或注射器移植法  欲移植定量的液体培养物或表面有液体石蜡油的厌氧菌培养物，可以利用吸管或注射器移植，其操作方法是以无菌吸管或无菌注射器吸取培养物，代替接种环进行移植。