埃希氏菌属(Escherichia)有5个种,其中与人和动物密切相关的是大肠埃希氏菌(E.coli),俗称大肠杆菌。它是人和动物肠道内正常菌群成员之一,人和动物出生后数小时即可经口进入消化道后段,大量繁殖而定居,终身伴随,并随粪便排出,污染土壤、水源等,在自然界分布极广。大肠杆菌的存在说明直接或间接有粪便污染的可能,故食物、食品、饮水等含大肠杆菌的多少是其卫生检验指标之一。某些致病菌株,可引起人的婴幼儿腹泻和动物的大肠杆菌病。本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象。
一、形态与染色
大肠杆菌为革兰氏阴性卵圆形或短杆菌,大小为1~
二、培养特性
本菌为需氧、兼性厌氧菌,在普通营养琼脂上生长良好,最适生长温度为
三、生化特性
本菌生化特点是能发酵多种糖类,产酸产气。大多数菌株均发酵乳糖,约半数菌株能发酵蔗糖;不产生硫化氢;不分解尿素;吲哚试验和M.R试验均为阳性,V-P试验和柠檬酸盐利用试验均为阴性,这4个试验也是区别与大肠杆菌相似的产气肠杆菌的主要生化试验。
四、抗原构造
大肠杆菌有O、K、H三种抗原成分,根据三种抗原组合不同,可将本菌分成不同的血清型。
五、抵抗力
本菌抵抗力中等,但各菌株间可能有差异。一般均可被巴氏消毒杀死。常用的消毒药液在数分钟内即可杀死本菌。在潮湿、阴暗而温暖的外界环境中,本菌的存活不超过1个月,在寒冷而干燥的环境中存活较久。
六、致病性
不同血清型的大肠杆菌常使不同人群和不同动物发病。引起腹泻的大肠杆菌有三组,即肠毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli,简称ETEC)、肠致病型大肠杆菌(Enteropathogenic E.coli,简称EPEC)和肠侵袭型大肠杆菌(Enteroinvasive E.coli,简称EIEC)。
ETEC能产生耐热和不耐热肠毒素(heat-stable extcrotoxin和heat-labile exterotoxin,ST和LT),它们刺激小肠粘膜上皮细胞,使肠液分泌量大增,出现霍乱样的腹泻症状;ETEC菌株另一类致病因子就是粘着素抗原,即K88、K99、987P和F41,它们可粘附于小肠绒毛上皮细胞上,不易脱落,增强了细菌的致病性。致幼龄动物腹泻的大肠杆菌几乎都是ETEC菌。EPEC菌株不产肠毒素,致病因子不详,可引起婴儿腹泻,成人为带菌者。EIEC菌株可引起人痢疾样症状,有些血清型可致婴儿中毒性消化不良。
多数致病性大肠杆菌可产生溶血素。使猪发生水肿病的大肠杆菌不产生肠毒素,但能产生神经毒素,使猪出现水肿和神经症状。
此外,大肠杆菌对成年动物一般不致病,但当它们侵入到肠道外组织器官时,即可引起化脓性炎症,如人的肾盂肾炎、膀胱炎、胆囊炎等;鸡的败血症、气囊炎及卵黄性腹膜炎。
七、微生物学诊断
对致病性大肠杆菌引起的动物疾病,败血症时可从病变组织取材料、下痢时可从下痢粪便或小肠粘膜取材料,划线接种麦康凯或伊红美兰平板分离培养,挑取典型菌落做溶血和生化试验检查。必要时做肠毒素试验、接种小白鼠和血清学检查。
对食品卫生检查致病性大肠杆菌,基本步骤是预增菌、选择性增菌、分离培养和生化试验。若要鉴定ETEC菌株,必须做家兔或乳鼠的肠毒素试验;要做EPEC菌株鉴定时,须做EPEC的三种OK多价血清玻片凝集试验;对EIEC菌株鉴定时,除做EIEC的三种OK多价血清学检查外,还要做豚鼠角膜试验来确定。
此外,检查食品被大肠杆菌污染的程度,可做大肠菌群最近似数的测定试验。
八、免疫与治疗
因为致病性大肠杆菌血清型复杂,很难以一种菌株的菌苗取得普遍免疫的效果,所以目前没有预防大肠杆菌病的较为理想、可广泛使用的菌苗。
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