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食源性致病菌检测技术(13)
2011-9-2 9:54:38 食品伙伴网

  副溶血性弧菌

    副溶血性弧菌根据菌体O抗原不同,现已有13个血清群。主要引起食物中毒。副溶血性弧菌进入人体后会在消化道内迅速繁殖生长,产生大量的肠毒素。患者会出现剧烈腹痛、腹泻、呕吐和发热,大多数患者会中度脱水。如果抢救不及时,患者会因为严重脱水而有生命危险。 

1.常规分离鉴定技术

    分离、鉴定:粪便、肛拭、呕吐物、可疑中毒食物及相关的容器涂拭物等,采用直接分离与增菌分离进行检测。检测方法参照何晓青(1991年)专著进行。副溶血性弧菌选择性平板采用科玛嘉显色平板,其菌落特征较典型。副溶血性弧菌的定量监测方法。可参照以最大可有数(MPN)方法进行测定。

    副溶血性弧菌鉴定方法包括生化鉴定、小鼠毒力试验、神奈川(KP)试验,KP很可能就是致病菌株。耐热溶血素检测,参照GB/T47897-2003FDA等检验方法,通过以上鉴定技术,确定副溶血性弧菌及其毒力情况。  

    PCR检测技术应用:副溶血性弧菌的耐热溶血素及耐热相关溶血素基因通过PCR扩增,在食源性疾病相关标本中直接检测毒力基因,该方法具有快速简便的特点,为食源性疾病的快速诊断提高有效的依据。检测副溶血性弧菌特有的基因片段(Pr72H)的方法,也可进行鉴定是否为副溶血性弧菌。  

    血清抗体检测:取急性及恢复期双份血清做间接凝血试验:取急性及恢复期双份血清做间接凝血试验,抗体效价呈4倍或以上增长,即可确诊。副溶血性弧菌抗体产生较早,一周之内可有明显升高,以后迅速下降。  

2.流行病学分型技术

    血清分型技术:副溶血性弧菌可分为13个血清群及67K抗原因子血清型。菌体须以121高压灭菌1小时后进行凝集试验,近年来副溶血性弧菌流行的血清型以O3K6为多见。  

    分子流行病分型技术:目前在副溶血性弧菌分子流行病学采用的方法有:PFGE、多重PCR、核酸体分型以及随机扩增多态性核糖核酸技术(RAPD)等。

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