支原体培养检验操作程序

一、接收标本：标本与检验单查对正确，标本质量合格。

二、标本处理：接种Uu、Mh 培养药敏一体试剂盒：操作前将所需试剂取出置室温30 分钟。1、A 排第一孔加入培养液100μL 作为阴性对照；2、将标本拭子直接放入培养液中充分振荡并在瓶壁挤干拭子，若为男性尿液取离心沉淀物150μL 或阳性标本取50μL 于培养液中混匀。3、将混有标本的培养液各100μL 加入A 排余下及B 排各孔中；4、各孔加矿物油覆盖，置于37℃温箱培养。

第24、48 小时分别观察记录结果。结果判断原理：培养基含有相应支原体生长所需的蛋白质、马血清、生长因子、底物及酚红指示剂，当有支原体生长时，底物被分解，使PH 值升高，培养基由橙黄色变成红色，且清亮为阳性。培养基不变色为阴性。B1 孔阳性为解脲支原体阳性；B2孔阳性为人型支原体阳性。药敏孔A 排为高浓度，B 排为低浓度，变红则耐药，不变红示敏感而不生长。当高浓度与低浓度两孔均不生长(不变色)为该药敏感；高浓度不变色低浓度变红为该药物中介；高浓度与低浓度均变红为该药物耐药。

结果一：第24  小时B1 孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第24 小时、48 小时观察B2 孔均不变色，示无人型支原体生长或浓度极低，报告培养出解脲支原体，未培养出人型支原体。

结果二：第24  小时B1 孔不变色示解脲支原体阴性；第48 小时观察B2 孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断。报告未培养出解脲支原体，培养出人型支原体附药敏结果。

结果三：第24  小时B1 孔由橙黄色变成红色示解脲支原体阳性，药敏看结果判断；第48 小时观察B2 孔由橙黄色变成红色示人型支原体阳性，药敏看结果判断，报告培养出解脲支原体与人型支原体附药敏结果。

结果四：阳性对照孔由橙黄色变成红色示支原体阳性，药敏看结果判断；第24 小时、48 小时观察B1 孔、B2 孔均不变色，示无解脲、人型支原体生长或浓度极低，报告培养出非解脲、人型支原体或嘱病人重留标本复查。

结果五：第24、48 小时观察B1 孔、B2 孔均不变色，示无支原体生长或浓度极低，报告未培养出解脲及人型支原体。