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FDA BAM菌落总数测定
2008-9-26 10:28:48 青岛海博
            
一、菌落总数定义:
   菌落总数是指在被检样品的单位重量(g)、容积(ml)或表面积(cm2)内,所含能于某种固体培养基上,在一定条件下培养后所生成的菌落的总数。
二、FDA BAM 菌落总数测定流程:
    检样xg/mL+9xml稀释液(磷酸盐缓冲液), 适当十倍稀释样品,选择2~3个连续适宜稀释度,各取1mL分别加入灭菌平皿内(每个稀释度做两个平行),每皿内加入适量平板计数琼脂(PCA),35 ℃ ,48 ± 2h,菌落计数 。
    选择25~250CFU之间的菌落进行计数,计算公式如下:
     N=∑C/(1*n1+0.1*n2)*d
所有平板的菌落数都不足25CFU,报告EAPC/ml(g)为<25*1/d。
     EAPC:estimated aerobic plate count
所有平板的菌落数都超过250CFU,但不足100/cm2 ,报告EAPC/ml(g)为最接近250CFU的平板菌落数的估计值,乘以相应的稀释度。
所有平板的菌落数都超过100/cm2 ,计算平板的面积(直径为90mm的平板面积为65cm2),估计最高稀释度每cm2的菌落数,乘以相应平板面积作为该稀释度的菌落计数结果,报告EAPC/ml(g)为>65*100* 1/d。
无法计数的平板报告LA(Laboratory Accident)。
最终结果保留前两位有效数字。按照4舍6入,5是奇进偶不进。

三、菌落总数测定几点要求
每个样品从开始稀释到倾注最后一个平皿所用的时间不得超过15min,主要为防止细菌增殖和产生片状菌落。样液与琼脂应充分混合,避免将混合物溅到平皿壁和皿盖上。皿内琼脂凝固后,不要长时间放置,然后倒置培养,可避免菌落蔓延生长。
检样过程中应用稀释剂做空白对照,用以判定稀释液、培养基、平皿或吸管可能存在的污染。同时,检样过程中应在工作台上打开一块空白平板计数琼脂,其暴露时间应与检样时间相当,以了解检样在检验操作过程中有无受到来自空气的污染。
检样稀释液有时带有食品颗粒,为避免与细菌菌落发生混淆,可作一检样稀释液与平板计数琼脂混合的平皿,不经培养,于4 ℃放置,以便在计数检样时用作对照。



   
   
   
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