品红亚硫酸钠琼脂培养基的工作原理:
乳糖发酵的细菌产生乙醛,在存在碱性品红的情况下乙醛与亚硫酸钠结合形成红色菌落,快速发酵乳糖的细菌产生金属光泽,不发酵乳糖的细菌形成无色透明的菌落。品红亚硫酸钠琼脂培养基中的蛋白胨、酵母粉、牛肉粉可提供碳氮源、维生素和矿物质;乳糖为可发酵的糖类;琼脂是培养基的凝固剂;磷酸氢二钾为缓冲剂;亚硫酸钠能将碱性品红还原,使其褪色,发酵乳糖的细菌产生乙醛,与亚硫酸钠和碱性品红生成红色菌落。
品红亚硫酸钠琼脂培养基配制及使用时的一些注意事项:
(1)碱性品红是一种碱性染料,微溶于水,在水中的溶解度为1%,能溶于乙醇,在无水乙醇中的溶解度为8%,因此在配制培养基时应先用无水乙醇将碱性品红充分溶解后再加入。
(2)碱性品红的颜色来源于它的大共轭体系,亚硫酸盐能破坏品红的大共轭体系使品红褪色,加热能否恢复成红色就看其共轭结构能否恢复,因此我们会看到品红亚硫酸钠培养基在灭菌前是淡红色的,灭菌后温度高时为红色,待冷却后红色会褪色。倒好的平板放置时间过长可能会使红色加深,因此要及时使用。
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