用途:用于产气荚膜梭菌的平板计数。
原理:胰蛋白胨和酵母浸粉碳源,氮源、维生素和生长因子;多粘菌素B和硫酸新生霉素可抑制革兰氏阴性菌,一定浓度的硫酸新生霉素可抑制其他梭状芽孢杆菌的生长,且产气荚膜梭菌最适宜在46℃下进行培养;亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;琼脂是培养基的凝固剂。
操作步骤:
1、制备质控菌液。
2、吸取合适稀释度质控菌液1ml加入无菌平皿内,每个稀释度做连个平行。每个平皿倾注冷却至50℃的TSN琼脂15ml,缓慢旋转平皿,使质控菌液和培养基充分混匀。上述琼脂平板凝固后,再加入10ml冷却至50℃的TSN琼脂均匀覆盖平板表层。
3、待琼脂凝固后,正置于厌氧培养装置内46℃厌氧培养不超过18小时,记录实验结果。典型的产气荚膜梭菌在TSN琼脂平板上为黑色菌落。
微生物试验:
接种以下质控菌株,正置于厌氧培养装置内46℃厌氧培养不超过18小时:
方法的局限性:本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
TSN琼脂微生物质控结果
a:产气荚膜梭菌,b:大肠埃希氏菌,c:铜绿假单胞菌
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