一、作用:硫乙醇酸盐流体培养基主要用于培养需氧、厌氧和微需氧微生物,是培养厌氧菌的首选培养基。该培养基在药典中一直被用作无菌检查培养基,具有重要的作用。
二、原理:硫乙醇酸盐流体培养基的主要成分:胰酪蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、氯化钠、L-胱氨酸(半胱氨酸盐酸盐)、硫乙醇酸钠(硫乙醇酸0.6 mL)、琼脂、刃天青等。
其中胰酪蛋白胨、酵母浸出粉提供氮源以及供合成蛋白质必须的各种氨基酸和生长因子,葡萄糖提供碳源及能源;氯化钠维持均衡的渗透压;胱氨酸、硫乙醇酸盐、葡萄糖均可降低氧化还原电位的作用,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性,有利于厌氧菌的生长,另外,硫乙醇酸盐有钝化含砷和汞类药物及其他金属防腐剂的有害作用;刃天青作为氧化还原的指示剂,氧化时呈红色,以此指示培养基的氧化还原电位;琼脂可以防止液体对流,即防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散,有利于厌氧环境的形成。
三、硫乙醇酸盐流体培养基的特点:
从硫乙醇酸盐流体培养基的成分分析可以总结出该培养基的特点主要有:
(1)含有较全面的营养,能满足绝大多数细菌的营养需求;
(2)培养基的不同深度上层、中层、下层部位可以分别模拟提供有氧、弱氧至无氧不同氧含量的梯度环境,使厌氧细菌、兼性厌氧细菌、好氧菌均可在此培养基中生长;
(3)成份相对简单,制作简便;
(4)含少量琼脂,流动性与普通液体培养基有区别。
四、使用时的注意事项:
制作硫乙醇酸盐流体培养基时,需要注意以下问题:
(1)硫乙醇酸盐流体培养基有少量的的琼脂,在灭菌后,培养基应呈现无浑浊状态,如果放置一段时间,出现轻微浑浊,尤其是放入冰箱后,浑浊现象更加明显。浑浊程度一方面可能与培养基用的琼脂质量有关,另一方面也可能与灭菌是否彻底有关,应具体分析。如果是前者可考虑更换培养基厂家或批号、或者更换琼脂,如果是后者则应检查仔细灭菌操作和灭菌设备。
(2)培养基在灭菌后至使用过程中取放应避免摇晃,以免培养基因振动而进入氧气,影响培养基的使用,接种操作应动作迅速、敏捷,否则暴露在空气中过长,培养基被氧化。
(3)在接种前,氧化层的颜色(粉红色)如果超过培养基深度的1/5,须经水浴煮沸加热至粉红色消失(不超过20 min),并迅速冷却。培养基加热只限一次,以免培养基质量下降。
(4)刃天青应以新鲜配制为准,否则影响判断。
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