产品特点:
本品为海博新推出的袋装即用型培养基,是一种加热灭菌好的成品培养基,水浴加热后可直接用于制备平板。
相较于干粉培养基,省去了称量、溶解、灭菌等繁琐的配制过程,使用方法更方便快捷;
相较于即用型平板培养基具有包装简单,便于运输,不易污染,成本低等优点。
用途:用于沙门氏菌的选择性分离培养(中国药典)。
保存条件:2-25℃;保质期六个月。
成分(g/L)
酵母浸出粉
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3.0
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L-赖氨酸
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5.0
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乳糖
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7.5
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蔗糖
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7.5
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木糖
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3.5
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氯化钠
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5.0
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硫代硫酸钠
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6.8
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枸橼酸铁铵
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0.8
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脱氧胆酸钠
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2.5
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酚红
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0.08
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琼脂
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13.5
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pH值7.4±0.2
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25℃
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检验原理:
酵母浸出粉为细菌生长提供维生素和辅助因子;木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。除志贺氏菌外,其他大多数肠杆菌均发酵木糖,加入赖氨酸是为了鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,形成的酸性环境有利于该菌产生脱羧酶,沙门氏菌使赖氨酸脱羧,从而使培养基的pH 升高向碱性转变,但这种转变可因其他菌发酵乳糖和蔗糖产生大量的酸而被阻止。在碱性的条件下,硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与沙门氏菌产生的硫化氢反应,使得菌落的颜色呈黑色;但当酸性条件下时,这种反应被抑制。苯酚红作为酸碱指示剂,氯化钠维持体系渗透压平衡,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。
使用方法:
步骤1【复溶加热】:将未拆封的HBBD培养基(保留外层包装袋)完全浸入100℃沸水浴中。
加热方式:
建议使用电磁炉+不锈钢锅/不锈钢桶等容器(加水至完全浸没袋体)。或使用实验室水浴锅(需注意升温较慢,建议提前预热)
·加热时容器勿完全密封,避免压力升高导致袋内漏液。
·可选用带孔的容器盖,或留出一些缝隙排气----详情见视频。
步骤2【溶解】:持续加热20~30分钟后,轻摇袋体确认培养基完全溶解(均匀液态无凝块)。
步骤3【冷却】:取出袋体,自然冷却至45℃~50℃(手感微热不烫)。
步骤4【无菌倾注】:在无菌环境下,撕开外层包装,拧开瓶盖,将培养基缓缓倾注至无菌平皿中,静置凝固后使用。
不同细菌在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基上的生长特征:
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肠炎沙门氏菌CMCC50760
无色菌落,有黑心
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大肠埃希氏菌ATCC25922
黄色菌落
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福氏志贺氏菌CMCC51572
无色菌落,无黑心
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甲型副伤寒沙门菌CMCC50093
无色菌落,无黑心
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奇异变形杆菌CMCC49005
黄色菌落,有黑心
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鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028
无色菌落,有黑心
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木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基(袋装即用型)(200ml)(药典)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置30-35℃需氧培养18-48小时。
注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
相关资料:
操作视频|培养基的加热灭菌操作(以XLD 、SC为例)-点击查看实验操作视频
木糖赖氨酸脱氧胆酸钠(XLD)琼脂原理及实验现象 点击查看
GB4789.4 沙门氏菌检验程序 点击查看