用途:用于军团菌的分离培养(GB/T 18204.5-2025标准)。
添加剂:
每瓶培养基需配套添加5盒HB8493a L-半胱氨酸盐酸盐和5盒HB8493b 可溶性焦磷酸铁使用,
每100ml BCYE琼脂培养基需要1支HB8493a L-半胱氨酸盐酸盐和1支HB8493b 可溶性焦磷酸铁。
成分(g/L)
酵母浸粉
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10.0
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ACES缓冲液
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10.0
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活性炭
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2.0
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α-酮戊二酸单钾盐
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0.4
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氢氧化钾
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2.8
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琼脂
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15.0
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pH值6.8±0.2
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25℃
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检验原理:
军团菌生长缓慢,一般需在2.5%二氧化碳气体环境下可生长良好,并且对铁盐和半胱氨酸具有依赖性。此培养基中的酵母浸粉和α-酮戊二酸可为军团菌的生长提供基本营养和能源;ACES缓冲剂(N-2-乙酰氨基乙醇磺酸)可使军团菌不需二氧化碳,在空气环境中即能生长;活性炭具有解毒、收集二氧化碳和改变表面张力的作用;L-半胱氨酸盐酸盐和焦磷酸铁为军团菌的必须生长因子。若配制培养基时不添加L-半胱氨酸盐酸盐,可制成BCYE-CYS培养基,用于军团菌的鉴别培养。
用法:
称取本品40.2g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,加入1支L-半胱氨酸盐酸盐(0.04g/支)和1支可溶性焦磷酸铁(0.025g/支),混匀,倾入无菌平皿。
注:加入添加剂后若pH值不正确,用KOH进行调整。
注:培养基中含不溶性活性炭,整体培养基呈黑色。
GVPC琼脂/BCYE琼脂培养基/BCYE-Cys琼脂微生物质控结果:

GVPC平板上嗜肺军团菌及博兹曼军团菌生长(培养至72h)
BCYE平板上的嗜肺军团菌、博兹曼军团菌(培养至72h)和大肠埃希氏菌(培养24h)
BCYE-CYS平板上的嗜肺军团菌、博兹曼军团菌(培养48h)和大肠埃希氏菌(培养24h)
因GVPC琼脂培养基和BCYE培养基本身不具有显色功能,导致杂菌与军团菌的菌落特征上不好区分,但可以通过培养时间及BCYE-cys进行排除,48h内形成大菌落的均不是军团菌,BCYE-Cys上能生长的均不是军团菌。
BCYE琼脂培养基(GB/T 18204.5标准)微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养72-168小时。
标准依据:
GB/T 18204.5-2025 公共场所卫生检验方法 第5部分集中空调通风系统
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