藏药翁布不同提取物的体外抑菌实验研究

摘要：目的研究藏药翁布不同提取物的体外抑菌作用。方法采用滤纸片扩散法对藏药翁布Myricaria germanica (L.) Desv.水提物和醇提物分别进行了体外抑菌实验研究。结果藏药翁布水提物和醇提物对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为70%和50%，对其他8种菌的最低抑菌浓度均在5%以下，有显著的抑菌作用。结论翁布水提物的抑菌效果好于醇提物。

　　关键词：翁布；  水提物；  醇提物；  抑菌

　　Bacteriostasis Study of the Different Extracts from the Traditional Tibetan Herb Myricaria germanica (L.) Desv in vitro

　　Abstract：ObjectiveTo study the bacteriostasis in vitro of aqueous extract and alcohol extract from the Tibetan herb Myricaria germanica. MethodsFilter paper dispersion Result: The MIC of aqueous extract and alcohol extract to E. coli were 70% and 50% respectively, and the MIC of the other eight bacteria was under 5%. ConclusionThe extracts has obvious bacteriostasis effects, and the bacteriostasis effect of aqueous extract is better than that of alcohol extract.

　　Key words：Myricaria germanica (L.) Desv;   Aqueous extract;   Alcohol extract;   Bacteriostasis

   

　　藏药翁布原植物为柽柳科Tamaricaceae水柏枝属Myricaria Desv，水柏枝Myricaria germanica (L.) Desv.，灌木，高达2.5 m，茎直立且多数分枝，枝红棕色；叶小，线形或线状长圆形，分布于西藏、青海、四川、云南、甘肃、陕西、山西，生长于海拔2 000～2 900 m的河滩环境［1］，为传统藏药，据《晶珠本草》记载，翁布有清热解毒，发散透疹，治黄水病的功效［2］。清热解毒中草药对多种细菌或病毒所致的感染性疾病有良好的治疗效果［3］，本文分别采用翁布的水提物和醇提物对多种菌进行体外抑菌实验，拟观察翁布体外的抑菌效果，为藏药翁布的开发和应用提供基础理论依据。

　　1  材料与仪器

　　1.1  药物藏药翁布采自青海省祁连县海拔2 900 m的河滩，由青海师范大学生命与地理科学学院吴学明教授鉴定。

　　1.2  菌种枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、梭状芽孢杆菌Clostridium sp.、变形杆菌Proteus vulgaris、大肠杆菌Escherichia coli、痢疾杆菌Shigella dysenteriae、巨大芽孢杆菌Bacillas megaterium、八叠球菌Sarcina maxima、四联球菌Tetracoccus sp.，由青海师范大学生命与地理科学学院微生物实验室提供，以牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养［4］。

　　1.3  仪器HH・S114电热恒温水浴锅，XMTA7000水夹套培养箱，YX280B手提式压力蒸汽消毒器，ZHJH1115无菌操作台。

　　2  方法

　　2.1  藏药翁布的水提法［5］将阴干翁布嫩枝剪碎，称取50 g，置烧杯中加蒸馏水浸泡30 min后加热煮沸，再用文火加热30 min，过滤得第1次水提取物，将滤渣用同样方法得第2次、第3次水提取物，合并3次滤液，置于烧杯中，在70℃恒温水浴锅中蒸发浓缩至50 ml，得到翁布水提物（含生药量1 g/ml）。

　　2.2  藏药翁布的醇提法［5］将阴干翁布嫩枝剪碎，称取50 g，加70％的乙醇150 ml回流提取1 h后，过滤得第1次乙醇提取物，将滤渣再次回流得第2次、第3次乙醇提取物，合并3次滤液，减压蒸馏除去乙醇至50 ml，得到翁布醇提物（含生药量1 g/ml）。

　　2.3  菌种活化培养［3］将各菌株接种到牛肉膏蛋白胨斜面培养基中，37℃培养24 h后，利用血球板计数法将各菌株用无菌水配制成浓度约为107个/ml的菌悬液，备用。

2.4  最低抑菌菌浓度（MIC）的测定［6］将上述藏药翁布水提物和醇提物（浓度100％）用蒸馏水稀释配制成浓度为1%，2%，3%，4%，5%，10%，20%，30%，40％，50％，60％，70％，80%的试液，采用滤纸片扩散法测定各种菌的最低抑菌浓度。用打孔器将新华滤纸打成8 mm的圆片，滤纸经高压灭菌后，放在试液及空白对照的生理盐水中浸泡30 min，沥去多余试液，用无菌镊子放在涂好菌液的培养基上，25℃培养24 h，以滤纸片周围刚出现抑菌圈的浓度为最低抑菌菌浓度（MIC），各浓度设3个重复，取其平均值。

　　2.5  藏药翁布提取物的抑菌实验［6］将上述藏药翁布水提物和醇提物（浓度100％），以生理盐水作为对照，采用滤纸片扩散法测量滤纸片周围形成的抑菌圈直径，重复3次，取其平均值。比较翁布水提物和醇提物的抑菌作用。

　　3  结果

　　3.1   藏药翁布最小抑菌浓度（MIC）测定藏药翁布不同提取物对各菌的最小抑菌浓度（MIC）测定结果见表1。由表1可知，藏药翁布水提物和醇提物对大肠杆菌的抑菌作用不明显，最低抑菌浓度分别为70％和50％，对其他8种菌均有明显的抑菌作用，最低抑菌浓度均为5％以下，有显著的抑菌作用。

　　3.2   藏药翁布不同提取物抑菌效果藏药翁布水提物和醇提物的抑菌结果见表2。

　　表1  翁布不同提取物对各菌的最小抑菌浓度(略)

　　表2  藏药翁布不同提取物对各菌的抑菌圈直径(略)

　　由表2可知，藏药翁布水提物和醇提物都有很强的抑菌作用，从抑菌圈直径看，醇提物对四联球菌的抑菌效果好于水提物，而水提物对其它菌的抑菌效果较好。

　　4   讨论

临床资料表明，清热解毒中草药对多种细菌所致的感染性疾病有良好的治疗效果。现代实验研究显示，清热解毒类中草药能抑制细菌的糖、蛋白质、核酸代谢，抑制细菌繁殖，提高巨噬细胞、中性白细胞吞噬功能［3］。本实验所用藏药翁布具有清热解毒作用，其水提物和醇提物对本实验提供的常见菌种都有相近最低抑菌浓度（大肠杆菌除外）和不同程度的抑菌作用，如金黄色葡萄球菌能引起皮肤粘膜、多种组织器官的化脓性炎症，是最常见的化脓性球菌［7］，因此，本实验结果可为开发藏药翁布作为治疗化脓性感染的药物提供基础研究数据。藏药翁布对其他致病菌有无抑制作用有待于进一步研究。

作者：鲍敏  曾阳 米琴陈振宁《时珍国医国药》

　　参考文献：

　　［1］  中国科学院西北高原研究所.藏药志［M］.西宁：青海人民出版社，1991：318.

　　［2］  毛继祖，罗达尚，王振华，等.晶珠本草（蒂马尔、丹增彭措著）［M］.上海：上海科学技术出版社，1986.

　　［3］  夏稷子，千里光.五种中草药的体外抑菌实验［J］.中国微生态学杂志，1997，9（4）：50.

　　［4］  沈  萍，范秀容，李广武.微光扬学实验［M］.北京：高等教育出版社，2000：214.

　　［5］  陈  奇.中药药理实验方法学［M］.上海：上海科技出版社，1996：67.

　　［6］  黄秀梨.微生物实验指导［M］.北京：高等教育出版社施普林格出版社，2001:62.

［7］  陆德源.医学微生物学，第5版［M］.北京：人民卫生出版社，2001:93.