一、简要说明

  GB 4789.35-2023于2023年9月6日发布，将于2024年3月6日实施。新标准中不但对正文内容做了一些变动：

  增加了实时荧光PCR方法为选做方法；

  修改了乳酸菌的定义、样品制备和培养时间；

  修改了嗜热链球菌和乳杆菌计数方法的描述；

  修改了部分培养基成分、储备液浓度和制备方法。

  同时对两个重要的培养基（MRS和MC）成分和名称也做了改动，引入了三个新产品（稀释液、DNA提取液、10×PCR缓冲液），另外对两款生化管的名字也做了调整。

  现将变动内容进行详细比较，方便操作人员正确选用产品和进行试验操作。

二、详细比较

   新版标准（2023版）相对旧版标准（2016版）变更的内容详细列举如表1。

表1  新旧标准变更内容详细比较表格

三、变化解读

  从对比表中不难看出，新版标准中，

  （1）术语和定义，更加具体完善，明确列出乳酸菌是“不能液化明胶、不产生吲哚、革兰氏阳性、无运动、无芽孢、触酶阴性、硝酸还原酶阴性及细胞色素氧化酶阴性反应的细菌”；

  （2）设备和材料中，设备增加了“厌氧培养装置：厌氧培养箱、厌氧罐、厌氧袋或能提供同等厌氧效果的装置”，“实时定量PCR仪、恒温水浴锅或金属浴、离心机：离心力>10000×g”，“无菌平皿：直径90mm”、“PCR管”，同时对冰箱的温度范围和移液器吸头的的量程及电子天平的精确度都做了完善或调整；

  （3）样品处理过程中，引入了“稀释液”，不再使用“生理盐水”；

  （4）检验程序中，增加了“乳杆菌计数”的操作步骤，所有的培养时间均由原来的“72h±2h”改成“48h-72h”。

  （5）稀释和培养过程中，新增了“经特殊技术（如包埋技术）处理的含乳酸菌食品应按照相应技术/工艺要求进行稀释”；

  （6）培养基的温度，由“48℃”，改为“48℃~50℃”，培养基的倾注量，由“15mL”改为“15mL~20mL”；

  （7）菌落计数和结果表述及报告，均简化描述，直接与GB4789.2对接，采用“见GB 4789.2”相关部分这种表述方式；

  （8）菌种纯培养，描述为“嗜热链球菌接种于MC琼脂平板，置36℃±1℃有氧培养48h，乳杆菌属接种于MRS琼脂平板置36℃±1℃厌氧培养48h”更加准确。

  （9）菌种鉴定，引入实时荧光PCR法。

  （10）除了新增鉴定方法外，对重要的培养基配方也进行了优化，常用的MRS、MC培养基，在配方和制备条件上都有更新，旧标准中所有的高压灭菌条件均为121℃高压灭菌15min~20min，新版标准中，全部改为“121℃高压灭菌15min”。

四、新产品展示

  顺应标准的更新，我们对相关培养基也做了变更，除正常销售现行标准（2016版）配套培养基外，还及时引入了新标准（2023版）中新增和有所变化的培养基，现将对应的产品信息列入下表（表2），相关人员可根据自己的实际情况选择购买、使用。有关新产品的详细情况，还可参考：

  青岛海博--GB4789.35-2023乳酸菌检验中涉及到培养基变化的列表 点击查看

表2  新旧标准中涉及的部分培养基及编号

注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。