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哥伦比亚MUG培养基原理和使用方法

 张辉
录入时间:2020-5-14 10:18:22 来源:青岛海博生物

一、试验原理:

 

 哥伦比亚MUG培养基用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)。

 特殊蛋白胨和可溶性淀粉作为培养基中的基础营养物质,提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子;氯化钠维持培养基的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide,MUG)的β-糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366 nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。

 

二、培养基配方(g/L):

 

特殊蛋白胨

23.0

氯化钠 5.0

可溶性淀粉

1.0
琼脂 15.0
pH值7.3±0.2(25℃)

 

三、试验方法:

 

 1.称取本品4.4g和0.01g MUG,加热溶解于100mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min,冷至55-60℃左右时,倾入无菌平皿,备用;

 2.使用前,把制备好的平板放置室温10-20min;

 3.制备质控菌液;

 4.取100μL质控菌液涂布接种于待测培养基和TSA上;

 5.放置36±1℃需氧培养24±2小时,记录试验结果。

 

四、试验结果判断:

 

 接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。

 注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。

质控菌株

菌株编号

接种量(CFU)

生长情况

其他特征

大肠埃希氏菌

ATCC 25922

20-200

+++

在366nm紫外灯下有荧光

大肠埃希氏菌

CMCC 44568

20-200

+++

在366nm紫外灯下有荧光

鼠伤寒沙门氏菌

ATCC 14028

20-200

+++

在366nm紫外灯下无荧光

     

哥伦比亚MUG培养基质控结果:366nm紫外灯照射下

A:大肠埃希氏菌ATCC 25922;B:大肠埃希氏菌CMCC 44568;

C:鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028;


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 注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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