MR-VP培养基

点击下载清晰视频

操作步骤：
1.挑取实验菌苔接种于生理盐水管中，制备菌悬液，本实验以大肠埃希氏菌、单增李斯特氏菌、产气肠杆菌为例，进行实验；
2.然后用移液枪吸取100ul菌悬液，接种于磷酸盐葡萄糖胨水培养基中，每种菌接种2个试管；
3.之后放置于36℃培养24-48h。

MR实验：
向试管中滴加3滴甲基红试剂，观察颜色变化，接种大肠杆菌和单增李斯特氏菌的试管变红，为阳性反应；接种产气肠杆菌的试管不变红，为阴性反应。
实验原理：不同细菌分解葡萄糖的产物不同，大肠杆菌、单增李斯特氏菌可分解葡萄糖产生大量酸，使pH值下降到4.5以下，所以滴入甲基红显红色; 产气肠杆菌产酸较少，所以滴入甲基红显橙黄色。

VP实验：
另取试管，向试管中滴加V-P试剂A液（6%α-萘酚-乙醇溶液）9滴，B液（40%氢氧化钾溶液）3滴，建议最低使用量为A液6滴、B液2滴。充分振荡混匀，之后置于36±1℃培养0.5-4h。
培养结束后观察结果，发现接种大肠杆菌的试管不变红，为阴性反应；接种单增李斯特氏菌和产气肠杆菌的试管变红，为阳性反应。
实验原理：产气肠杆菌、单增李特氏菌分解葡萄糖产生丙酮酸，并使丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，在碱性溶液中被空气氧化生成二乙酰,继续与培养基中的胍基反应生成红色化合物，即为V-P阳性。