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一、样品稀释
1.固体和半固体样品：称取25 g样品，放入盛有225 mL磷酸盐缓冲液的无菌均质杯内， 8000 r/min～10000 r/min均质1 min～2 min，制成1:10样品匀液，或放入盛有225 mL磷酸盐缓冲液的无菌均质袋（HBJ001含225ml磷酸盐缓冲液均质袋）中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min制成1:10的样品匀液。
2.液体样品：以无菌吸管吸取25 mL样品置盛有225 mL磷酸盐缓冲液的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
注意：样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时分别用1 mol/L NaOH或1 mol/L HCl调节。
3.用1 mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 mL，沿管壁缓缓注入9 mL磷酸盐缓冲液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1 mL无菌吸管或吸头反复吹打，使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。
二、初发酵试验
每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤每管接种1 mL（如接种量超过1 mL，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24 h±2 h。
三、结果观察
观察小倒管内是否有气泡产生，24 h±2 h产气者进行复发酵试验，如未产气则继续培养48 h±2 h。产气者进行复发酵试验。