1.水样过滤

  用无菌镊子夹取无菌滤膜边缘部分，贴放在已灭菌的滤头上，固定好滤器，将100 mL水样或稀释后的水样（用无菌生理盐水或无菌磷酸盐缓冲液稀释）通过孔径0.45μｍ的滤膜过滤。

2.培养

  将过滤后的滤膜贴在远藤琼脂培养基平板上，滤膜截留细菌面向上，平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。然后将平板倒置，36℃±1℃培养24h±2h。

3.结果观察与计数

  观察滤膜上面的菌落特征，并计数可疑菌落。大肠菌群典型菌落在远藤琼脂培养基上具有以下特征之一：

  a）紫红色，具有金属光泽；

  b）深红色，不带或略带金属光泽；

  c）淡红色，中心颜色较深。

4.确证试验

  按比例挑取10个不同形态的可疑菌落（不足10个则全挑），分别接种到营养琼脂培养基平板上，36℃±1℃培养24h±2h。

  从营养琼脂培养基平板上挑取单菌落进行革兰氏染色镜检观察；同时接种乳糖蛋白胨培养液，经36℃±1℃培养24h±2h。可疑菌落为革兰氏阴性无芽孢杆菌，使接种的乳糖蛋白胨培养液变黄并产气，则判定为大肠菌群阳性。