生化确认

1.鸟氨酸脱羧酶试验

  接种鸟氨酸脱羧酶氯化钠肉汤,在肉汤上面覆盖1mL灭菌矿物油。37℃±1 ℃培养 24 h±3 h。 培养后液体混浊变紫为阳性反应(细菌生长,鸟氨酸脱羧)。液体黄色为阴性反应。

2.赖氨酸脱羧酶试验

  接种赖氨酸脱羧酶氯化钠肉汤,在肉汤上面覆盖1mL灭菌矿物油。37℃士1℃培养 24 h±3 h。 培养后液体混浊变紫为阳性反应(细菌生长,赖氨酸脱羧)。液体黄色为阴性反应。

3.精氨酸双水解酶试验

  接种精氨酸双水解酶氯化钠肉汤,在肉汤上面覆盖1mL灭菌矿物油。37℃±1 ℃培养24 h±3 h。

  培养后液体混浊变紫为阳性反应(细菌生长,精氨酸双水解)。液体黄色为阴性反应。

4.β-半乳糖苷酶试验

  挑取可疑菌落,在装有0.25mL氯化钠溶液的试管中制成菌悬液,加入一滴甲苯,振摇试 管。将试管放入37℃±1 ℃水浴锅中,静置5min。再加入0.25mLβ-半乳糖苷酶试剂混匀。

  将试管放入37℃±1 ℃水浴锅中,放置24h士3h,随时观察。

  培养后液体变黄为阳性反应(存在β-半乳糖苷酶)。反应结果通常20min后可见。24h后无颜色 变化为阴性反应。

5.靛基质试验

  将可疑菌落接种于装有5mL胰蛋白胨-色氨酸氯化钠肉汤(5.11)中。37℃±1 ℃培养 24h±3 h。 培养后加入1mL Kovacs’试剂。形成红色环为阳性反应(形成吲哚),黄色环为阴性反应。

6.氯化钠耐受试验

  准备一系列浓度的氯化钠蛋白胨水(5.12),氯化钠浓度依次为:0%、2%、4%、6%、8%和10%。

  用待鉴定菌落的菌悬液接种每个试管。37℃±1 ℃培养 24h士3h。观察试管中液体变混浊可知细菌能在相应的氯化钠浓度下生长。