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饮用天然矿泉水中粪链球菌的检验


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  粪链球菌又叫粪肠球菌,是一种革兰染色阳性球菌。粪肠球菌是人体肠道内的正常菌群,人的大便中含有大量的粪肠球菌,每克粪便中大约有107个粪肠球菌。粪肠球菌通常不感染人,但在人应用抑制免疫力药物导致人体免疫力下降等情况下,会导致粪肠球菌感染。粪链球菌检验是饮用天然矿泉水检验标准的必检项目。

具体操作

(1)水样过滤

  用无菌镊子夹取无菌滤膜边缘部分,贴放在已灭菌的滤头上,固定好滤器,将250mL水样或稀释后的水样,通过孔径0.45μm的滤膜过滤。

(2)培养

  将过滤后的滤膜贴在KF链球菌琼脂培养基平板上,滤膜截留细菌面向上,平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。将平板倒置,36℃±1℃培养48h±2h。

(3)结果观察与计数

  粪链球菌典型菌落在滤膜上呈现大小不等的红色或粉红色,计数可疑菌落。

(4)确证试验

  a.从滤膜上按比例挑取10个不同形态的可疑菌落(不足10个则全挑),接种到脑心浸液琼脂培养基平板上,36℃±1℃培养24h~48h。

  b.用接种环从脑心浸液琼脂培养基平板上挑取培养物进行革兰氏染色,镜检观察,可疑菌应为革兰氏阳性球菌。

  c.用接种环从脑心浸液琼脂培养基平板上挑取培养物到一片清洁的载玻片上,滴加2滴~3滴新鲜配制的3%过氧化氢到载玻片的涂抹菌处。

  如果30s内有气泡发生,则过氧化氢酶反应为阳性,则该菌不属于粪链球菌,确证试验到此即可停止。

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