1.概念

  MPN计数法（Most Probable Number，最大可能数法）是一种用于估算微生物（如细菌、真菌等）数量的统计学方法，尤其适用于难以直接计数或活菌数较低的样本（如水体、土壤、食品中的微生物检测）。

2.稀释梯度的选择

  在MPN计数法中，稀释梯度的确定需结合样本特性与检测目标，核心原则是让最终接种管的阳性结果落在“可统计区间”内。目标是使最高稀释度出现部分阴性管，最低稀释度全为阳性管，从而通过阳性管数组合查表计算。

  稀释倍数的选择非常重要，为了避免出现实验失误的情况，通常多做几个稀释倍数，同时接种培养，根据结果评估有效稀释倍数。比如，9管法原本只要3个稀释倍数就可以了，我们实际操作的时候，通常多做几个倍数，选取结果比较可取的倍数进行进一步查表确认。

3、确定最适的3个连续稀释度

 以10-1～10-55个连续稀释度的 MPN 计数法为例,按如下方法确定其中最适的3个连续稀释度。

 A：有1个及以上的稀释度3管均为阳性

  （1）选择3管都是阳性结果的最高稀释度及其相连的2个更高稀释度;

  （2）在未选择的较高稀释度中还有阳性结果时,则顺次移到下一更高的3个连续稀释度,

  （3）如果在更高的没有被选择的稀释度还有阳性结果,则将此阳性结果加到选择的最高稀释度,进而确定3个连续稀释度

  （4）如果不能按照本规则找到3个合适的稀释度,则从前一个较低的稀释度开始,选 择3个连续稀释度。

 B：没有任何1个稀释度3管均为阳性

  （5）选择3个最低稀释度

  （6）如果在更高的没有被选择的稀释度还有阳性结果,将阳性 结果都加到选择的最高稀释度,进而确定3个连续稀释度。

  依据上面的方法，确定出最适合的3个连续稀释度。按照确定的3个数字，进一步查阅MPN表，即可得出样品中的菌数值。