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蜡样芽胞杆菌检验(二)-确定鉴定试验


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生化鉴定

  1、从营养琼脂中挑取纯培养的单个菌落,分别在酪蛋白琼脂、甘露醇卵黄多粘菌素琼脂、胰酪胨大豆羊血琼脂和西蒙氏柠檬酸盐进行划线,放置相应的温度下进行培养,观察试验结果;

  2、动力实验和明胶液化试验:用接种针挑取纯培养单个菌落,分别在动力培养基和明胶生化管上进行穿刺实验,不要插入底部,放置相应的温度进行培养,观察试验结果;

  3、吸取50-100 μL试验菌的菌悬液(接种量>5000 CFU),分别接种于硝酸盐肉汤生化管、溶菌酶生化管、葡萄糖发酵管、甘露醇发酵管中,36℃±1℃培养18 h-24 h;

  4、V-P试验:将试剂盒A液和B液分别滴加到含有疑似菌的葡萄糖蛋白胨水培养基中,观察实验结果。

  5、根状生长试验:挑取单个可疑菌落按间隔2 cm-3 cm左右距离划平行直线于经室温干燥1 d-2 d的营养琼脂平板上,30℃±1℃培养24 h-48 h,不能超过72 h。

  6、淀粉水解试验:吸取待测菌悬液100 μL,接种于可溶性淀粉培养基内,36℃±1℃培养72 h-96 h,然后向试管内滴加2-3滴碘液,观察培养基变色情况。

  7、此外还需要做革兰氏染色试验、过氧化氢酶试验和蛋白质毒素晶体试验。

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