一、试样的制备

进行微生物检验的饲料，采样和试样制备按GB/T 14699.1规定执行。应遵循以下要求：

1、实验室样品应真实、具有代表性，在运输和贮存过程中没有发生损失或改变。

2、采样应在无菌操作下进行。

3、采样工具，如探子、铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子等，必须是灭菌的。

4、根据样品种类，

  如袋装、瓶装和罐装者，就取完整的未开封的。

  如果样品很大，则需用无菌采样器取样；

  样品是固体粉末，应边取边混和；

  是流体的，通过振摇混匀；

  样品送到微生物检验室越快越好，一般应不超过3 h。

  如果路途遥远，可将试样于0℃~5℃保存。

二、操作步骤

1、增菌

称取饲料试料25 g，加人装有225 mL GN培养菌液的500 mL广口瓶内，于36℃培养6 h-8 h。培养时间视细菌生长情况而定，当培养液出现轻微混浊时即应止培养。

2、分离和初步生化试验

  （1）取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板，于36℃培养18 h--24 h，志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。

  （2）挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培养18 h-24 h，分别观察结果。

  （3）凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。（三糖铁结果为斜面红色，底层黄色，不产生硫化氢，不产气）