一、培养基的选择

  生孢梭菌的平板计数可选择TSA平板、哥伦比亚琼脂平板、血琼脂平板等培养基均可。

二、平板的预处理

  在接种前，可将倒好的平板在超净工作台中先吹干15-30min，这样使培养基表面保持相对干燥，减少培养过程中水汽导致菌落蔓延现象，再将吹干后的平板放置于厌氧环境中过夜除氧。

三、梯度稀释菌液

  使用0.1%蛋白胨水或pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液将培养好的生孢梭菌进行梯度稀释，操作要迅速，避免生孢梭菌死亡。

四、快速涂布接种

  迅速取出除氧后的平板，将生孢梭菌菌液涂布至平板，再快速放入厌氧培养袋中，放入厌氧产气包，置于30-35℃培养24-48h。